Ποια είναι τα πρότυπα για την ηλεκτροφορητική επεξεργασία;

Ποια είναι τα πρότυπα για την ηλεκτροφορητική επεξεργασία;

Η βασική αρχή της ηλεκτροφόρησης είναι ότι αναφέρεται στη διαδικασία των φορτισμένων σωματιδίων που μεταναστεύουν υπό τη δράση ενός ηλεκτρικού πεδίου. Πολλά σημαντικά βιομόρια, όπως αμινοξέα, πεπτίδια, πρωτεΐνες, νουκλεοτίδια, νουκλεϊκά οξέα κ.λπ., έχουν ιονιζόμενες ομάδες που μπορούν να φέρουν θετικά ή αρνητικά φορτία σε συγκεκριμένη τιμή pH. Κάτω από τη δράση ενός ηλεκτρικού πεδίου, αυτά τα φορτισμένα μόρια θα κινηθούν προς την κατεύθυνση του ηλεκτροδίου αντίθετη από την πολικότητα του φορτίου τους.

Η ηλεκτροφορητική ικανότητα είναι η ικανότητα διαχωρισμού, προσδιορισμού ή καθαρισμού δειγμάτων χρησιμοποιώντας το ηλεκτρικό πεδίο, το οποίο προκαλεί τα φορτισμένα μόρια να κινούνται με διαφορετικές ταχύτητες λόγω των διαφορών στις φορτισμένες ιδιότητες των διαφόρων μορίων στο δείγμα που πρόκειται να διαχωριστεί, καθώς και των διαφορών στο μέγεθος, το σχήμα και άλλες ιδιότητες των ίδιων των μορίων. Η διαδικασία ηλεκτροφόρησης πρέπει να πραγματοποιηθεί σε υποστηρικτικό μέσο. Η ηλεκτροφόρηση ελεύθερης διεπαφής που διεξήχθη από τους Tiselius et al. το 1937 δεν είχε ένα σταθερό μέσο στήριξης, έτσι η διασπορά και η μεταφορά ήταν σχετικά ισχυρές, επηρεάζοντας το φαινόμενο διαχωρισμού. Παρουσιάζει λοιπόν ηλεκτροφόρηση με σταθερό υποστηρικτικό μέσο, ​​όπου το δείγμα υφίσταται διαδικασία ηλεκτροφόρησης σε σταθερό μέσο, ​​μειώνοντας την παρεμβολή διασποράς και μεταφοράς.

Τα αρχικά υποστηρικτικά μέσα ήταν διηθητικό χαρτί και μεμβράνη οξικής κυτταρίνης, τα οποία σήμερα χρησιμοποιούνται λιγότερο συχνά στα εργαστήρια. Για μεγάλο χρονικό διάστημα, μικρομοριακές ουσίες όπως αμινοξέα, πεπτίδια, σάκχαρα κ.λπ. συνήθως διαχωρίζονταν και αναλύονταν με ηλεκτροφόρηση χρησιμοποιώντας διηθητικό χαρτί ή πλάκες λεπτής στιβάδας κυτταρίνης ή πυριτικής πηκτής ως μέσα. Ωστόσο, επί του παρόντος, πιο ενεργές τεχνικές όπως η HPLC χρησιμοποιούνται συνήθως για ανάλυση. Αυτά τα μέσα είναι κατάλληλα για το διαχωρισμό ουσιών μικρών μορίων, με απλή και βολική λειτουργία. Ωστόσο, η επίδραση διαχωρισμού των διαταραγμένων βιομορίων είναι σχετικά φτωχή. Η εισαγωγή της γέλης ως υποστηρικτικού μέσου έχει προωθήσει σε μεγάλο βαθμό την ανάπτυξη των δεξιοτήτων ηλεκτροφόρησης, κάνοντας τις δεξιότητες ηλεκτροφόρησης να γίνουν μία από τις σημαντικές τεχνικές για την ανάλυση βιολογικών μακρομορίων όπως οι πρωτεΐνες και τα νουκλεϊκά οξέα.

Η ηλεκτροφορητική επεξεργασία δεν είναι δύσκολη, αλλά πρέπει επίσης να γνωρίζουμε ότι υπάρχουν ορισμένα πρότυπα για την ηλεκτροφορητική επεξεργασία, διαφορετικά δεν ξέρουμε αν η ποιότητα είναι κατάλληλη. Ποια είναι λοιπόν τα πρότυπα για αυτήν την ηλεκτροφορητική επεξεργασία;

1. Λεία επιφάνεια

Αυτή είναι βασική προϋπόθεση, αν η επιφάνεια δεν είναι λεία, τότε χάνεται το βασικό προσόν.

2. Ομοιόμορφο πάχος

Η ηλεκτροφορητική επεξεργασία απαιτεί τη διασφάλιση ομοιόμορφου πάχους για την αποφυγή εμφάνισης χρωματικών διαφορών.

3. Δεν υπάρχουν εμφανείς ρωγμές στην επιφάνεια